发明创造名称：一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方法
外观设计名称：
决定号：193254
决定日：2019-10-22
委内编号：1F259670
优先权日：
申请（专利）号：201610018471.4
申请日：2016-01-12
复审请求人：丽水学院
无效请求人：
授权公告日：
审定公告日：
专利权人：
主审员：崔军
合议组组长：王名松
参审员：丛丽晓
国际分类号：C08B37/00,C08J11/02,A61P39/06,A61P37/04,A61P35/00,A61P1/16,A61P27/12
外观设计分类号：
法律依据：专利法第22条第3款
决定要点
：具备创造性而获得专利保护的技术方案，首先应当确实能够解决其要解决的技术问题。不能确认能够解决技术问题的技术方案，不存在任何技术贡献，不具备突出的实质性特点和显著的进步。
全文：
本复审请求涉及申请号为201610018471.4，名称为“一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方法”的发明专利申请（下称本申请）。申请人为丽水学院。本申请的申请日为2016年01月12日，公开日为2016年06月01日。
经实质审查，国家知识产权局原审查部门于2018年08月24日发出驳回决定，驳回了本申请，其理由是：权利要求1 和2不符合专利法第22条第3款的规定。驳回决定所针对的文本是：申请人于申请日2016年01月12日提交的说明书摘要、于2016年04月20日提交的说明书第1-51段（第1-6页）、以及于2018年04月04日提交的权利要求第1-2项。
驳回决定所针对的权利要求书如下：
1. 一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
a取500mL烧瓶，称量5g铁皮石斛粉末，用80mL石油醚加热回流2h，静置2h，将上层石油醚废液倒入石油醚回收瓶；再加入80mL石油醚加热回流2h，静置2h，将上层石油醚废液倒入石油醚回收瓶；
b在石油醚旋转蒸发仪上蒸干残留石油醚，得脱脂铁皮石斛粉末；步骤b中石油醚旋转蒸发仪的水浴温度60℃，压力-0.1Mpa；
c将石油醚回收瓶中的石油醚放在石油醚旋转蒸发仪上旋蒸回收石油醚；步骤c中石油醚旋转蒸发仪的水浴温度90℃，压力-0.1Mpa；
d将脱脂铁皮石斛粉末2g加入250mL超纯水溶解，磁力搅拌器上搅拌12小时；
e将上述250mL铁皮石斛粉末水混物倒入500mL圆底烧瓶，接在蛇形冷凝管上，水浴加热60℃，冷凝回流3h，提取石斛粗多糖；
f将回流液放入布氏漏斗用两层快速滤纸，设置压力-0.05Mpa抽滤，取滤液；
g将所得抽滤液放在水旋转蒸发仪蒸干至50mL左右，将旋蒸浓液加入450mL无水乙醇，搅拌5min，静置12小时；步骤g中水旋转蒸发仪的水浴温度60℃，压力-0.1Mpa；
h将上述静置后乙醇溶液小心倒入乙醇回收瓶，将沉淀物用20mL无水乙醇溶液，洗涤3次，同时将乙醇洗涤液倒入乙醇回收瓶；在乙醇旋转蒸发仪蒸干沉淀上残留乙醇；步骤h中乙醇旋转蒸发仪水浴温 度60℃，压力-0.1Mpa，步骤i中乙醇旋转蒸发仪水浴温度75℃，压力-0.1Mpa；
i将乙醇回收瓶中乙醇放入醇旋转蒸发仪回收乙醇；
j计算粉末质量后，将粉末置于500mL三角瓶，重新用100mL超纯水溶解，在磁力搅拌器上搅拌12小时；
k将上述多糖溶液加入等体积sevage溶液，摇床震荡10h，使其充分接触溶解；
l将多糖和sevage溶液混合液，倒入分液漏斗，静置12小时；
m将分液漏斗下sevage溶液倒入sevage溶液回收瓶，将乳浊液倒入离心管，在离心机上8000r/min，离心30min，取上清，弃沉淀；
n汇集离心上清液，在sevage溶液旋转蒸发仪，抽掉sevage溶液残留成分，同时将溶液体积蒸干至50mL左右；步骤n中sevage溶液旋转蒸发仪水浴温度60℃，压力-0.1Mpa；
o检测粗多糖含量，同时检测蛋白质含量；
p将sevage溶液回收瓶中sevage溶液中放入氧化钙吸收水分，然后将上清液放入sevage溶液旋蒸仪上提取sevage溶液；步骤p中sevage溶液旋转蒸发仪水浴温度95℃，压力-0.1Mpa；
q上柱，分离。
2. 根据权利要求1所述的一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方法，其特征在于，所述sevage溶液由体积比正丁醇：氯仿＝1：4的溶液构成。
驳回决定中指出：权利要求1请求保护一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方法，对比文件1（CN101015649A，公开日为2007年08月15日）公开了一种铁皮石斛多糖提取物及其制备方法。权利要求1与对比文件1相比的区别特征在于：1）两者所用的原料不同；两者的脱脂、水提、浓缩、醇沉、sevage除蛋白工艺略有不同；2）前者在醇洗后，sevage脱蛋白工艺后，还包括回收有机溶剂的工艺，且前者还限定了脱脂、醇沉、醇洗、sevage脱蛋白后有机溶剂回收的具体工艺。基于上述区别特征，可以确定本申请实际解决的技术问题是如何降低铁皮石斛多糖提取的成本。然而前述区别特征已经被对比文件1公开，或者属于本领域技术人员的常规技术手段和普通技术知识，或者为本领域技术人员所知晓的内容（参见证明文件2：“中药制剂前处理新技术与新设备（第1版）”，蔡宝昌等，第183-184页，中国医药科技出版社，2005年11月30日；证明文件3：“天然药物化学（第1版）”，沈彤等，第21-22页，甘肃科学技术出版社，2010年7月31日），因此权利要求1不具备创造性。从属权利要求2进一步限定的内容是本领域技术人员在对比文件1公开内容的基础上有能力选择的，因此权利要求2也不具备创造性。
申请人丽水学院（下称复审请求人）对上述驳回决定不服,于2018年08月30日向国家知识产权局提出了复审请求，同时修改了权利要求书。复审请求人认为：
从整体技术方案的角度，新的权利要求1技术方案解决的技术问题是提供一种降低提取成本的前提下使蛋白含量降低到5mg/L以下的，具有绿色、环保的基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方法。
对比文件2虽然谈到了旋转蒸发器的概念，但是仅仅是概念的层面，本申请文件权利要求1技术方案不同成分用的旋转蒸发仪不一样，且相应的温度、压力控制也不一样，从而达到不同的技术效果，对本领域人员来说就是一种创新。对比文件2也更没有给出解决降低提取成本的前提下使蛋白含量降低到5mg/L以下的的技术问题的启示。
所以新的权利要求1技术方案具有突出的实质性特点。
本申请文件具有如下技术效果对比文件和现有技术都没有公开：
1通过本发明专利可以回收99%以上的石油醚、乙醇、氯仿、正丁醇等有机溶剂，实现了有机溶剂的循环使用，降低提取成本，具有绿色、环保、经济的有力优势。
2多糖溶液通过sevage溶液1次去蛋白后，经Bradford法-考马斯亮蓝G-250检测后，已经检测不到，蛋白含量降低到约5mg/L以下，去除效果良好。
3 申请号201510237026.2《一种铁皮石斛多糖的纯化方法》在提取1g铁皮石斛粉末时用掉的乙醇溶液在70-200mL；本发明专利提取1g铁皮石斛粉末时，回收溶剂后，用掉的乙醚为10mL，乙醇为7.5mL；查询国药网站http://www.sinoreagent.com/（2015年12月3日），乙醚价格为13.5元/500mL；无水乙醇为9.5元/500mL。经计算提取1g铁皮石斛粉末，溶剂费用为0.95-2.28元，而本发明仅耗费0.0825元。
因为这些技术效果对比文件和现有技术都没有报道过，所以可以说是意想不到，所以新的权利要求1技术方案具有显著的进步。
复审请求时新修改的权利要求书如下：
1. 一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方法，其特征在于包括如下步骤：
a取500mL烧瓶，称量5g铁皮石斛粉末，用80mL石油醚加热回流2h，静置2h，将上层石油醚废液倒入石油醚回收瓶；再加入80mL石油醚加热回流2h，静置2h，将上层石油醚废液倒入石油醚回收瓶；
b在石油醚旋转蒸发仪上蒸干残留石油醚，得脱脂铁皮石斛粉末，石油醚旋转蒸发仪的水浴温度60℃，压力-0.1Mpa；
c将石油醚回收瓶中的石油醚放在石油醚旋转蒸发仪上旋蒸回收石油醚，石油醚旋转蒸发仪的水浴温度90℃，压力-0.1Mpa；
d将脱脂铁皮石斛粉末2g加入250mL超纯水溶解，磁力搅拌器上搅拌12小时；
e将上述250mL铁皮石斛粉末水混物倒入500mL圆底烧瓶，接在蛇形冷凝管上，水浴加热60℃，冷凝回流3h，提取石斛粗多糖；
f将回流液放入布氏漏斗用两层快速滤纸，设置压力-0.05Mpa抽滤，取滤液；
g将所得抽滤液放在水旋转蒸发仪蒸干至50mL左右，将旋蒸浓液加入450mL无水乙醇，搅拌5min，静置12小时，旋转蒸发仪的水浴温度60℃，压力-0.1Mpa，乙醇旋转蒸发仪水浴温度60℃，压力-0.1Mpa；
h将上述静置后乙醇溶液小心倒入乙醇回收瓶，将沉淀物用20mL无水乙醇溶液，洗涤3次，同时将乙醇洗涤液倒入乙醇回收瓶；在乙醇旋转蒸发仪蒸干沉淀上残留乙醇；
i将乙醇回收瓶中乙醇放入醇旋转蒸发仪回收乙醇，乙醇旋转蒸发仪水浴温度75℃，压力-0.1Mpa；
j计算粉末质量后，将粉末置于500mL三角瓶，重新用100mL超纯水溶解，在磁力搅拌器上搅拌12小时；
k将上述多糖溶液加入等体积sevage溶液，摇床震荡10h，使其充分接触溶解，sevage溶液由体积比正丁醇：氯仿＝1：4的溶液组成；
l将多糖和sevage溶液混合液，倒入分液漏斗，静置12小时；
m将分液漏斗下sevage溶液倒入sevage溶液回收瓶，将乳浊液倒入离心管，在离心机上8000r/min，离心30min，取上清，弃沉淀；
n汇集离心上清液，在sevage溶液旋转蒸发仪，抽掉sevage溶液残留成分，同时将溶液体积蒸干至50mL左右，sevage溶液旋转蒸发仪水浴温度60℃，压力-0.1Mpa；
o检测粗多糖含量，同时检测蛋白质含量；
p将sevage溶液回收瓶中sevage溶液中放入氧化钙吸收水分，然后将上清液放入sevage溶液旋蒸仪上提取sevage溶液，sevage溶液旋转蒸发仪水浴温度95℃，压力-0.1Mpa；
q上柱，分离。
经形式审查合格，国家知识产权局于2018年09月12日依法受理了该复审请求，并将其转送至原审查部门进行前置审查。
原审查部门在前置审查意见书中认为：
（1）对比文件2和对比文件3证明在植物有效成分提取过程中，采用减压蒸馏的方式回收提取过程中使用的有机溶剂是本领域技术人员基于回收有机溶剂，降低成本所采用的常规技术手段；对比文件1在提取铁皮石斛多糖的过程也记载了需要回收乙醇，可见，对比文件1也有回收有机溶剂的需求。而为了避免旋转蒸发仪的交叉使用导致回收的有机溶剂中夹带其他溶剂造成的污染，不同的有机溶剂采用不同的旋转蒸发仪对本领域技术人员而言亦是显而易见的；至于旋转蒸发的温度和压力，本领域技术人员可根据有机溶剂的沸点和有机溶剂的蒸出情况进行调整。
（2）在多糖提取领域，为了提高多糖的纯度，往往需要尽可能地降低蛋白质的含量；而sevage法作为脱蛋白的惯用技术手段，可以有效地去除多糖中残留的蛋白质；本申请和对比文件1均采用sevage法脱蛋白，且基于目前申请人提供的证据，看不出本申请的sevage脱蛋白工艺存在哪些改进点可以显著降低多糖中的蛋白质的含量，因此，本领域技术人员有理由认为在对比文件1公开的sevage法脱蛋白的工艺的基础上，采用常规试验手段，比如正交试验设计、曲面响应法等，容易得到如本申请记载的蛋白含量低的多糖。而采用旋转蒸发仪回收石油醚、乙醇及sevage溶液等溶剂所带来的成本的降低、绿色、环保的效果也是本领域技术人员可预期的。
因而坚持原驳回决定。
随后，国家知识产权局成立合议组对本案进行审理。
合议组于2019年09月17日向复审请求人发出复审通知书，指出：本申请采用了多种不同的溶剂及采用多个旋转蒸发器，会造成成本的变化，而不是成本明显降低；采用sevage溶液可去除蛋白，但仅达到本领域采用sevage法去除蛋白的水平。也就是说，复审请求人争辩的具有三方面技术效果的理由不成立，本申请实质上未能解决技术问题，也未取得声称的技术效果。因而，权利要求1不具备创造性。
复审请求人于2019年10月08日提交了意见陈述书，未修改申请文件。复审请求人重申了复审请求时类似的意见：
本发明采用了多个旋转蒸发器，但是使用的溶剂大幅度减少，即原材料大幅减少，具有意想不到的技术效果。
通过本发明专利可以回收99%以上的石油醚、乙醇、氯仿、正丁醇等有机溶剂，实现了有机溶剂的循环使用。
多糖溶液通过sevage溶液1次去蛋白后，经Bradford法-考马斯亮蓝G-250检测后，已经检测不到，蛋白含量降低到约5mg/L以下，去除效果良好。
所以，在整体技术方案和整体技术效果的角度讲，本发明具有创造性。
在上述程序的基础上，合议组认为本案事实已经清楚，可以作出审查决定。
二、决定的理由
审查文本的认定
本决定所针对的文本为：复审请求人于2016年04月20日提交的说明书第1-51段（第1-6页）、说明书摘要和2018年08月30提交的权利要求第1项。
具体理由的阐述
专利法第22条第3款规定，创造性，是指与现有技术相比，该发明具有突出的实质性特点和显著的进步，该实用新型具有实质性特点和进步。
具备创造性而获得专利保护的技术方案，首先应当确实能够解决其要解决的技术问题。不能确认能够解决技术问题的技术方案，不存在任何技术贡献，不具备突出的实质性特点和显著的进步。
本申请在复审请求时提交的权利要求1如前所述。
合议组认为，要评价权利要求1保护的技术方案相对于现有技术是否具备创造性，首先要确认，该方案取得了何种技术效果，解决了何种技术问题。
在其原始提交的说明书中,给出了如下描述以表示本申请所取得的技术效果：
[0047] 1通过本发明专利可以回收99％以上的石油醚、乙醇、氯仿、正丁醇等有机溶剂，实现了有机溶剂的循环使用，降低提取成本，具有绿色、环保、经济的有力优势。
[0048] 2多糖溶液通过sevage溶液1次去蛋白后，经Bradford法-考马斯亮蓝G-250 检测后，已经检测不到，蛋白含量降低到约5mg/L以下，去除效果良好。
[0049] 3申请号201510237026.2《一种铁皮石斛多糖的纯化方法》在提取1g铁皮石斛粉末时用掉的乙醇溶液在70-200mL；本发明专利提取1g铁皮石斛粉末时，回收溶剂后，用掉的乙醚为10mL，乙醇为7.5mL；查询国药网站 http://www.sinoreagent.com/(2015年12月3日)，乙醚价格为13.5元/500mL； 无水乙醇为9.5元/500mL。经计算提取1g铁皮石斛粉末，溶剂费用为0.95-2.28 元，而本发明仅耗费0.0825元。
复审请求人认为权利要求1具备创造性的理由是：
本申请文件具有如下技术效果对比文件和现有技术都没有公开：
1通过本发明专利可以回收99%以上的石油醚、乙醇、氯仿、正丁醇等有机溶剂，实现了有机溶剂的循环使用，降低提取成本，具有绿色、环保、经济的有力优势。
2多糖溶液通过sevage溶液1次去蛋白后，经Bradford法-考马斯亮蓝G-250检测后，已经检测不到，蛋白含量降低到约5mg/L以下，去除效果良好。
3 申请号201510237026.2《一种铁皮石斛多糖的纯化方法》在提取1g铁皮石斛粉末时用掉的乙醇溶液在70-200mL；本发明专利提取1g铁皮石斛粉末时，回收溶剂后，用掉的乙醚为10mL，乙醇为7.5mL；查询国药网站http://www.sinoreagent.com/（2015年12月3日），乙醚价格为13.5元/500mL；无水乙醇为9.5元/500mL。经计算提取1g铁皮石斛粉末，溶剂费用为0.95-2.28元，而本发明仅耗费0.0825元。
合议组对上述技术效果分析如下：
认可权利要求1的方法可以回收各种有机溶剂，有机溶剂可以循环使用。
与申请号201510237026.2《一种铁皮石斛多糖的纯化方法》的方法相比，采用了不同价格的溶剂进行处理，成本会存在差异。
但上述两个方面的效果，并不能直接就得出本申请的提取方法成本低，绿色、环保、经济的结果。
首先，本申请采用了石油醚等多种有机溶剂进行提取，采用了多个旋转蒸发器进行蒸发，过程更为复杂，如果要得出节约成本的结论，需要进行详细的成本核算分析。仅仅从目前本申请公开的内容，并不能得出成本就可以降低的结论。况且，本申请仅仅是实验室水平进行的工作。如果是进行实际产业生产时，采用多种溶剂、多个蒸发装置、多次操作带来的成本是巨大的。同样不能得出本申请成本降低的结论。
其次，就多糖溶液通过sevage溶液去蛋白的处理过程，本申请描述了“经Bradford法-考马斯亮蓝G-250检测后，已经检测不到，蛋白含量降低到约5mg/L以下，去除效果良好”。本领域技术人员公知，Sevage法（有时写作Sevag）是本领域中进行蛋白分离的常用方法之一，通过Sevage法能够将多糖中的蛋白质除尽（参见《生物化学》，吴梧桐主编，中国医药科技出版社，2015年08月第3版第1次印刷，第101页；《生物活性成分分离技术》，王振宇等主编，哈尔滨工业大学出版社，2015年05月第1版第1次印刷，第78页；《发酵原料药》，张虎成等主编，中国轻工业出版社，2014年05月第1版第1次印刷，第241-242页）。因此，本申请在去除蛋白方面，也不能得出蛋白含量低的结论。
综上所述，可以得出的结论是，本申请采用了多种不同的溶剂及采用多个旋转蒸发器，会造成成本的变化，而不是成本明显降低；采用sevage溶液可去除蛋白，但仅达到本领域采用sevage法去除蛋白的水平。也就是说，复审请求人争辩的具有三方面技术效果的理由不成立。
因此，不能认可复审请求人主张的降低蛋白含量至5mg/L以下、成本降低、绿色环保等技术效果。
鉴于上述分析，仅仅能够得出本申请成本会有变化，蛋白去除水平仅为本领域采用Sevage法所能达到的水平。因此，本申请实质上未能解决技术问题，也未能取得声称的技术效果。本申请与对比文件1（CN101015649A，公开日为2007年08月15日）相比，尽管存在若干技术特征上的差异，但是，在不能确认本申请解决了其要解决的技术问题、取得了想取得的技术效果的情况下，对这些技术特征的调整仅仅是本领域普通技术人员的能力，这些适当的调整预期可改变提取成本、降低蛋白含量，这种调整不能使权利要求1要求保护的技术方案具备创造性。
一项技术方案是否具备创造性，并不取决于权利要求的长与短或技术特征的多与少，也不因其与对比文件1的技术方案存在的区别特征多少来决定。首先要确定申请是否确实解决了技术问题，产生了技术效果。本申请与对比文件1相比，技术效果只能说相当，而对回收溶剂等技术手段进行调整是本领域技术人员具备的能力。因此，权利要求1并不具备突出的实质性特点，也不具备显著的技术进步，不符合专利法第22条第3款的要求，不具备创造性。
对复审请求人相关意见的评述
由于复审请求人答复复审通知书时给出的意见与复审请求时提出的意见没有本质差异，本决定不再对其进行评述。
基于上述事实和理由，作出如下复审请求审查决定。
三、决定
维持国家知识产权局于2018年08月24日对本申请作出的驳回决定。
如对本复审请求审查决定不服，根据专利法第41条第2款的规定，复审请求人可以自收到本决定之日起三个月内向北京知识产权法院起诉。
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